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Human Dil-HDL,使用方法,红色荧光标记人源高密度脂蛋白

一、试剂描述

Human DiI-High Density Lipoprotein为荧光探针DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl- indocarbocyanine perchlorate)标记的高密度脂蛋白,可以用来观察培养细胞的HDL结合位点,或筛选HDL受体表达缺陷型细胞突变株。

也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平,或检测组织内的受体水平。

二、物理参数

【浓度】:0.8-3.0 mg/mL

【外观】:乳状液体

【Ex/Em】:549 nm/565 nm

【吸光度比例】:1.4

【缓冲液组分】:0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4

【规格】:500ug

【纯度】:≥95%

【运输条件】:冰袋运输,避免反复冻融。

【保存方法】:4℃无菌避光保存,收到后可稳定使用6周,不可冻存。

三、使用方法

制备方法

纯化的人健康血浆来源的HDL直接标记上DiI荧光探针,然后通过超速离心以及透析的方法纯化回收标记产物,并滤膜过滤除菌。

纯化的DiI-HDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS,pH 7.4中。

操作方法

稀释:无菌条件下,用细胞培养基或PBS将DiI-HDL稀释至10–30 μg/mL。

孵育:加入活细胞中,37℃培养4–5小时,使HDL与细胞表面受体结合。

洗涤:吸去培养基,用无探针培养基洗去未结合的DiI-HDL。

荧光显微镜检测:使用红色荧光滤光片(Ex/Em=549 nm/565 nm),避免甲醇/丙酮固定(DiI溶于有机溶剂)。

四、相关试剂

人源低密度脂蛋白

人极低密度脂蛋白

人源高密度脂蛋白

Ethidium Homodimer 1 (EthD-1)

Ethidium Homodimer 3 (EthD-3)

Propidium lodide 碘化丙啶(粉末)

Ethidium Bromide (EB) 溴化乙锭(EB,粉末)

FITC-PNA (FITC labeled Peanut Agglutinin)

Sulfidefluor 7 AM(SF7-AM)(H2S Probe)

EthidiumMonoazideBromide(EMA)叠氮溴化乙锭

SYBR 14Nucleic AcidStain(5mM)绿色荧光核酸染料

SYTOX Orange Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO)

Rhodamine-PNA(Rhodamine labeled PeanutAgglutinin)

SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000x in DMSO)

本文章(以上资料)由西安强化生物科技xxn编写!

特别提示:该试剂仅供科研机构实验室使用,严禁用于临床诊疗及食品领域!

http://www.xdnf.cn/news/7976.html

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