Human Dil-HDL,使用方法,红色荧光标记人源高密度脂蛋白
一、试剂描述
Human DiI-High Density Lipoprotein为荧光探针DiI(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl- indocarbocyanine perchlorate)标记的高密度脂蛋白,可以用来观察培养细胞的HDL结合位点,或筛选HDL受体表达缺陷型细胞突变株。
也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平,或检测组织内的受体水平。
二、物理参数
【浓度】:0.8-3.0 mg/mL
【外观】:乳状液体
【Ex/Em】:549 nm/565 nm
【吸光度比例】:1.4
【缓冲液组分】:0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4
【规格】:500ug
【纯度】:≥95%
【运输条件】:冰袋运输,避免反复冻融。
【保存方法】:4℃无菌避光保存,收到后可稳定使用6周,不可冻存。
三、使用方法
制备方法
纯化的人健康血浆来源的HDL直接标记上DiI荧光探针,然后通过超速离心以及透析的方法纯化回收标记产物,并滤膜过滤除菌。
纯化的DiI-HDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS,pH 7.4中。
操作方法
稀释:无菌条件下,用细胞培养基或PBS将DiI-HDL稀释至10–30 μg/mL。
孵育:加入活细胞中,37℃培养4–5小时,使HDL与细胞表面受体结合。
洗涤:吸去培养基,用无探针培养基洗去未结合的DiI-HDL。
荧光显微镜检测:使用红色荧光滤光片(Ex/Em=549 nm/565 nm),避免甲醇/丙酮固定(DiI溶于有机溶剂)。
四、相关试剂
人源低密度脂蛋白
人极低密度脂蛋白
人源高密度脂蛋白
Ethidium Homodimer 1 (EthD-1)
Ethidium Homodimer 3 (EthD-3)
Propidium lodide 碘化丙啶(粉末)
Ethidium Bromide (EB) 溴化乙锭(EB,粉末)
FITC-PNA (FITC labeled Peanut Agglutinin)
Sulfidefluor 7 AM(SF7-AM)(H2S Probe)
EthidiumMonoazideBromide(EMA)叠氮溴化乙锭
SYBR 14Nucleic AcidStain(5mM)绿色荧光核酸染料
SYTOX Orange Nucleic Acid Stain (5 mM in DMSO)
Rhodamine-PNA(Rhodamine labeled PeanutAgglutinin)
SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain (10,000x in DMSO)
本文章(以上资料)由西安强化生物科技xxn编写!
特别提示:该试剂仅供科研机构实验室使用,严禁用于临床诊疗及食品领域!