sgRNA的靶基因基因组如何获得？ for 下游的 T7E1验证

愿武艺晴小朋友一定得每天都开心！ 

---

1）在基因组，靶标区域上下游，设计引物（以Zfp532基因为例）：

        a. NCBI（Home - Gene - NCBI）Gene 页面上输入：Zfp532。 

      

      

     b. 在新的页面上，滚动至基因组区域，转录本和产物。

         观察到Zfp532有多个长短不一的转录本，其中竖立的绿色方框表示外显子，每个转录本所共有的方框即为同源区。随后点击右上角的“GenBank”按钮。

       

       c.在出现的新页面里面，下载序列：

           

      d. 用snapgene打开，并将sgRNA的位置，标注在靶标对应的位置，然后在sgRNA们的两头，设计引物，用于PCR。

            Tips : 邻近的sgRNA,可以共有一对PCR引物，for 下游T7E1的酶切的！

 

---

           如果我的文章对您有帮助，欢迎点赞收藏转发，这这这也是支持我不断进步的动力~

           如果有什么看不明白的地方，也欢迎在评论区留言~